過(guò)在流動(dòng)相使用過(guò)程中應該做的事情,除了有所為,還要有所不為,那有哪些習慣是需要避免的呢?
1、加入有機相之后再測量流動(dòng)相的PH值
通常情況下測量流動(dòng)相的PH值,是測量水相中的PH值參數。有機相加入之后PH值參數的測量就和之前有誤差。PS:但如果能保證每次測量都是加入相同量的有機相之后得到的PH值,雖然這不能保證精確度,但是這能保證前后一致的測量結果,所以這樣也沒(méi)有問(wèn)題。
2、不使用緩沖鹽
緩沖鹽的加入是用來(lái)控制和修正流動(dòng)相中PH值的改變的。樣品基質(zhì)、空氣中的CO2、水中的雜質(zhì)都會(huì )造成流動(dòng)相PH值的改變,而PH值的改變會(huì )影響樣品的保留、峰形、峰面積參數。
3、沒(méi)有在正確的緩沖區間使用緩沖鹽
每個(gè)緩沖鹽都有一定的緩沖范圍,在此范圍內它提供了最佳的pH穩定性。在這個(gè)范圍外,緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無(wú)效的。所以要么在正確的范圍內使用緩沖鹽,要么選擇一個(gè)緩沖范圍覆蓋所需pH值的緩沖鹽。
4、向有機相中加入緩沖鹽
如果將水相的緩沖溶液加入到有機相中,會(huì )大大增加緩沖鹽析出的風(fēng)險。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯,但會(huì )對儀器的各個(gè)部件都會(huì )產(chǎn)生一定影響。(延伸閱讀:做完樣品記得移除系統中的緩沖鹽哦?。?br />
5、梯度洗脫時(shí)直接用泵去混合流動(dòng)相并且流動(dòng)相比例從0%開(kāi)始
現在的液相色譜能夠非常高效的進(jìn)行在線(xiàn)脫氣和流動(dòng)相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開(kāi)始,會(huì )有比較大的出現氣泡和沉淀的風(fēng)險。(延伸閱讀:深度剖析等度洗脫和梯度洗脫的適用范圍和方法設置)
6、沒(méi)有使用正確的pH值修飾酸或堿作為緩沖液
緩沖溶液的修飾酸或堿,只使用生成緩沖鹽的酸或堿。例如,磷酸鈉緩沖液只能用磷酸或氫氧化鈉調節。
7、沒(méi)有在方法中說(shuō)明緩沖液的全部信息
例如只在方法中寫(xiě)“稱(chēng)5克磷酸鈉溶入1000毫升水”。緩沖鹽的類(lèi)型決定其pH緩沖范圍,而緩沖鹽中所需物質(zhì)的濃度決定了緩沖強度。例如:5g的無(wú)水磷酸鈉和5g的一水磷酸鈉具有不同的緩沖強度,會(huì )影響保留率。
8、使用儀器時(shí)不調查之前使用的流動(dòng)相情況,直接用純有機溶劑沖系統
如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液,而這次沒(méi)有經(jīng)過(guò)調查就直接在B通道使用了純的有機溶劑,那么就會(huì )造成該通道緩沖鹽析出、出現堵塞等風(fēng)險。
9、將溶劑瓶中的流動(dòng)相用干為止
溶劑瓶中的流動(dòng)相如果用干,會(huì )導致儀器中出現氣泡等問(wèn)題。
10、僅使用超聲來(lái)給流動(dòng)相脫氣
超聲脫氣有一定的脫氣作用,但完全脫氣的效果并不理想。所以在此建議使用真空脫氣機進(jìn)行在線(xiàn)脫氣。
以上就是在使用流動(dòng)相時(shí),大家應該避免的10個(gè)壞習慣。歡迎大家分享自己的經(jīng)驗!
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