液相色譜技術(shù)開(kāi)始階段,是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相,稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法。液相色譜儀是一類(lèi)分離與分析技術(shù),其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。經(jīng)典液相色譜的流動(dòng)相是依靠重力緩慢地流過(guò)色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小。分離后的樣品是被分級收集后再進(jìn)行分析的,使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復雜。直到20世紀60年代.發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高壓輸液泵和自動(dòng)記錄的檢測器,克服了經(jīng)典液相色譜的缺點(diǎn),發(fā)展成高效液相色譜。
高效液相色譜法是目前各種色譜模式中應用較廣的一個(gè)領(lǐng)域,在化合物的分析方面,世界上約有80% 的化合物,包括高分子化合物、離子型化合物、熱不穩定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC(如正相 HPLC、反相 HPLC、離子交換色譜和離子色譜、體積排除色譜、親合色譜等等) 進(jìn)行分離分析。
高效液相色譜儀是從氣相色譜儀和液相色譜發(fā)展而來(lái)的,它的結構和操作流程較完善。高效液相色譜法及其聯(lián)用技術(shù)新的研究與發(fā)展,在化工生產(chǎn)、制藥工業(yè)、食品工業(yè)、生物化工、醫學(xué)臨床檢驗和環(huán)境監測等領(lǐng)域獲得了廣泛的應用,許多其他檢測方法與高效液相色譜法相比,經(jīng)過(guò)長(cháng)期反復驗證它們的可行性、準確性、精密性和效率,都因不如高效液相色譜法穩定、可靠、高效被淘汰。由此可見(jiàn),高效液相色譜法不僅對現在具有非凡的意義,在不久的將來(lái)也具有相當廣泛的發(fā)展前景